流動相作為液相色譜儀實現組分分離的核心載體，其穩定、連續的供應直接決定了儀器運行的穩定性和檢測數據的可靠性。在實際操作中，流動相供應不暢是較為常見的故障類型，常表現為泵壓異常波動、基線漂移、保留時間不穩定，嚴重時甚至導致儀器停機或色譜柱損壞。本文結合液相色譜儀的流路結構和實際應用場景，系統梳理流動相供應不暢的核心成因，提供分步驟的排查思路和針對性解決對策，為實驗室操作人員提供實操性指導。
一、流動相自身特性異常：供應不暢的源頭誘因
流動相的配制質量和物理化學特性是保障供應順暢的基礎，若存在溶劑純度不足、配比不當或狀態異常等問題，易從源頭導致供應受阻。這一類問題往往具有隱蔽性，需通過前期排查逐一確認。
溶劑純度不足或含有顆粒物是常見誘因。若使用的甲醇、乙腈等有機溶劑純度未達色譜級標準，或水相溶劑（如超純水）儲存不當受到污染，其中含有的微量雜質、膠體或微生物會在流路中逐漸累積。尤其是未經過濾的流動相，顆粒物會直接堵塞溶劑過濾器、單向閥或色譜柱入口篩板，形成“漸進式"堵塞，表現為供應壓力逐步升高。針對此類問題，需嚴格把控溶劑質量，確保所有有機溶劑均為色譜級，水相使用新鮮制備的超純水；同時，流動相配制完成后必須經0.22μm濾膜（有機相用有機系濾膜，水相或含鹽相用水系濾膜）減壓過濾，去除顆粒物和微生物。
流動相配比不當或分層、結晶是另一重要成因。在使用多元混合流動相時，若未按照“互溶優先"原則配制，如將強極性溶劑與弱極性溶劑直接快速混合，可能導致局部濃度不均或短暫分層；而含鹽流動相（如磷酸鹽緩沖液）若濃度過高、環境溫度過低，或儲存時間過長，易出現鹽結晶析出。這些異常狀態的流動相進入流路后，會造成泵腔填充不均、單向閥密封不嚴，表現為供應間斷性中斷。解決對策為：多元流動相配制時需按比例逐步混合并充分攪拌，確保均勻互溶；含鹽流動相需現配現用，濃度控制在合理范圍（通常不超過0.1mol/L），環境溫度低于10℃時需對儲液瓶進行適當保溫，避免結晶。
流動相脫氣不導致氣泡殘留，也是供應不暢的隱性因素。流動相中溶解的空氣在泵腔壓力變化時會形成微小氣泡，這些氣泡聚集在溶劑過濾器、單向閥或泵腔內，會占據流路空間，導致實際進入色譜柱的流動相體積不足，表現為泵流量顯示正常但實際供應不足。針對該問題，需建立“多重脫氣"流程：新配制流動相先經超聲脫氣20-30分鐘（水溫不超過40℃，避免溶劑揮發），再通過儀器在線脫氣機持續脫氣；對于易產生氣泡的混合流動相（如甲醇-水體系），可在儲液瓶中加入防泡劑（如微量甲醇胺），但需提前驗證其對檢測結果無干擾。
二、儲液與過濾系統故障：供應鏈路的關鍵梗阻點
儲液瓶、溶劑過濾器、吸液管路等組成的前端供應系統，是連接流動相與輸液泵的關鍵環節，其結構完整性和清潔度直接影響供應效率，也是故障高發區域。
溶劑過濾器堵塞或污染是最常見的故障點。溶劑過濾器（俗稱“砂芯"）安裝在吸液管末端，用于過濾流動相中殘留的微小顆粒物，若長期未更換或清洗，過濾膜會被顆粒物堵塞，導致吸液阻力增大，表現為泵吸液不足、壓力波動。此外，若流動相為含鹽體系，長期使用后鹽分會在過濾器內部結晶，進一步加劇堵塞。排查時可拆下溶劑過濾器，將其浸泡在5%硝酸溶液中超聲清洗30分鐘（去除鹽結晶），再用超純水沖洗至中性，晾干后重新安裝；若過濾器膜已破損或堵塞嚴重，需直接更換同型號過濾器（注意區分有機相和水相專用型號）。
吸液管路老化、破損或進氣也是重要誘因。吸液管通常為PEEK管或硅膠管，長期使用后會出現管壁老化變脆、接口松動，或因操作不當導致管路彎折、破損。老化的管路會因內壁粗糙增加液體流動阻力，破損或接口松動則會導致吸液時吸入空氣，形成氣阻。檢查時需逐一排查吸液管路，若發現管路彎折需重新整理固定，確保管路自然順暢；若存在破損或接口滲漏，需更換新的管路并擰緊接口卡套；對于使用超過1年的管路，建議定期更換，避免老化引發的隱患。
儲液瓶設計缺陷或使用不當也可能導致供應問題。部分老舊儲液瓶若未設置通氣孔，或通氣孔被堵塞，會導致瓶內負壓，當泵吸液時瓶內壓力無法及時平衡，形成“吸空"現象；此外，儲液瓶內吸液管未浸沒至流動相液面以下，或液面過低，也會導致泵吸入空氣。解決方法為：選用帶專用通氣孔的儲液瓶，定期檢查通氣孔是否通暢，必要時用針頭疏通；操作中確保吸液管末端浸沒深度不小于2cm，同時實時監控流動相液面高度，當液面低于5cm時及時補充，避免“干吸"。
三、輸液泵系統故障：供應動力的核心失效點
輸液泵作為流動相供應的動力源，其核心組件（如單向閥、柱塞桿、密封圈）的性能直接決定供應的穩定性，組件磨損、污染或校準異常均會導致供應不暢。
單向閥磨損或污染是泵系統故障的首要原因。單向閥的作用是控制流動相單向流動，其內部的閥芯和閥座若被流動相中的顆粒物磨損，或被強保留組分污染，會導致密封不嚴，出現“反流"現象，表現為泵壓力不穩定、流量精度下降。排查時可拆下單向閥，用異丙醇超聲清洗閥芯和閥座15分鐘，去除污染物；若觀察到閥芯或閥座有明顯劃痕，需更換單向閥組件。日常使用中，需避免使用未過濾的流動相，定期用甲醇沖洗泵腔，減少單向閥污染風險。
柱塞桿與密封圈磨損導致泄漏或壓力損失也較為常見。柱塞桿在泵腔內高頻往復運動，長期使用后會與密封圈之間產生磨損，導致流動相泄漏，或因密封性能下降使泵腔壓力無法維持，影響供應效率。故障表現為泵體表面有液體滲漏、泵壓無法達到設定值。此時需關閉儀器，拆下泵頭組件，檢查柱塞桿是否有劃痕、密封圈是否老化變形；若柱塞桿完好，更換新的密封圈即可；若柱塞桿已磨損，需同時更換柱塞桿和密封圈，更換后需重新校準泵的流量精度。
泵流量校準異常或程序設置錯誤也可能引發供應問題。若泵長期未進行流量校準，實際輸出流量與設定流量存在偏差，可能導致“相對供應不足"；此外，若儀器方法中誤設置了“梯度延遲"“流量限制"等參數，或梯度程序中溶劑比例切換過快，也會導致瞬時供應不暢。解決對策為：每季度對泵進行流量校準，使用稱重法（稱量一定時間內流出的流動相質量，計算實際流量）驗證，確保流量誤差在±1%以內；檢查儀器方法參數，刪除不必要的流量限制設置，梯度程序中溶劑比例變化速率控制在每分鐘不超過10%，避免瞬時壓力波動。
四、系統維護與預防：保障供應順暢的長效機制
流動相供應不暢的預防需建立“全流程管控"體系，涵蓋前期配制、中期操作和后期維護三個環節。前期需制定標準化的流動相配制流程，明確溶劑純度、過濾要求和脫氣規范；中期操作時需定期檢查儲液瓶液面、管路連接和壓力變化，發現異常及時停機排查；后期維護需建立設備臺賬，每半年更換一次溶劑過濾器、吸液管路和密封圈，每年對單向閥、柱塞桿進行全面檢修，每季度進行流量校準。
綜上，液相色譜儀流動相供應不暢是多因素共同作用的結果，需遵循“由前至后、由易到難"的排查原則：先檢查流動相自身質量和儲液系統，再排查輸液泵核心組件。通過精準定位故障點，采取針對性解決措施，并配合完善的日常維護機制，可有效保障流動相供應的穩定性，延長儀器使用壽命，確保檢測數據的準確性和可靠性。
