在預算有限的實驗室中，選購二手高效液相色譜儀是一項具性價比的決策。然而，由于設備經過前期使用，其性能狀態存在不確定性，因此投入使用前的校準與性能驗證至關重要。這不僅關系到分析結果的可靠性，更是確保科研數據準確與產品質量可控的基礎。一套完整的驗收流程應包含外觀檢查、硬件測試、性能驗證和系統適應性考察四個關鍵階段。
一、全面檢查與硬件測試
收到儀器后，首先需進行外觀檢查，查看主機、檢測器及配件是否有明顯的物理損傷，如裂痕或銹蝕。隨后是細致的硬件測試。關鍵步驟包括：
-輸液系統評估：啟動泵，設置不同流速（如0.5,1.0,2.0mL/min），用稱重法測定流速準確性（要求偏差＜±1%）和精密度（RSD＜0.5%）。同時檢查壓力脈動，確保泵密封性良好。
-自動進樣器驗證：進行多次進樣（如n=6），考察進樣量的準確性與精密度（RSD應＜2%），并觀察有無交叉污染。
-柱溫箱校準：設置多個溫度點（如25°C,40°C），用校準過的溫度計核實實際溫度與設定值的一致性（通常允差±2°C）。
-檢測器性能初檢：對UV檢測器，可在指定波長下（如254nm）測試基線噪聲和漂移，噪聲應小于±0.5mAU，漂移小于1mAU/h。
二、系統性能驗證與色譜柱評估
硬件功能正常后，需通過標準樣品進行綜合性能驗證。此過程旨在評估整機系統的分析能力。
-梯度精密度測試：執行一個線性梯度洗脫程序，重復運行多次，考察保留時間的重復性（RSD通常＜1%）。
-檢測器關鍵指標測試：
-線性與動態范圍：配制一系列不同濃度的標準品（如濃度覆蓋0.1-100μg/mL），進樣分析，其校準曲線的相關系數r²應大于0.999。
-靈敏度（信噪比）：進樣一個低濃度標準品，計算特定峰的信噪比（S/N），常規分析通常要求S/N>3（檢測限）或>10（定量限）。
-色譜柱效能確認：使用合適的測試標樣（如USP色譜柱測試標樣），在新的或驗證過的色譜柱上進行分析。計算理論塔板數（通常每米應數萬）、拖尾因子（應在0.8-1.8之間）和分離度（關鍵對應＞1.5），確保色譜柱性能滿足方法要求。
三、系統適應性試驗與文件歸檔
最后，必須結合實驗室未來的實際檢測項目，進行系統適應性試驗。即運行一個具體的、已建立的分析方法（例如，用C18柱分析一個已知樣品），確認關鍵參數（如理論塔板數、拖尾因子、分離度和重復性）是否符合該方法的既定標準。這是儀器能否正式“上崗”的最終考核。
所有校準、驗證的步驟、條件、結果和所使用的標準品信息，都必須被清晰、完整地記錄并歸檔。這份檔案不僅是儀器初始狀態的證明，也為未來的周期性再驗證和數據比對提供了至關重要的基準。
通過以上三個層次分明、循序漸進的步驟，可以最大限度地確保一臺二手HPLC儀器的性能與可靠性，使其在新的實驗室中迅速、可靠地投入科研或質檢工作，以嚴謹的驗證彌補其“二手”身份的潛在風險，為數據質量提供堅實保障。
